低温保存管(cryotube)中之一般菌种临时存放及活化
低温保存管之临时存放及解冻
1. 低温保存管(cryotube)应存放于-20℃ ~ -80℃之低温条件下。
2. 准备 37℃之 70﹪(V/V)酒精浴槽(只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,菌种哪家好,以免危险;若以 37℃水浴取代,应避免水中微生物污染),其中事先安放小试管架(可放置 cryotube 之大小),液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出,置于 37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube,液面不可高至管塞,直至结冰完全溶解(约需 2 分钟)。
菌种的衰退和复壮
在微生物的基础研究和应用研究中,选育一株理想的菌株是一件艰苦的工作,而欲使菌种始终保持优良性状的遗传稳定性,便于长期使用,还需要做很多日常的工作。实际上,由于各种各样的原因,菌种供应商,要使菌种永远不变是不可能的,菌种衰退是一种潜在的威胁。只有掌握了菌种衰退的某些规律,才能采取相应的措施,尽量减少菌种的衰退或使已衰退的菌种得以复壮。
EM菌生产工艺流程:
(1)将塑料桶、矿泉水瓶、量筒等用具经灭菌消毒处理备用。
(2)在每个桶中放入2公斤红糖,倒入45公斤干净的生水(自来水不可用来培育EM),然后加入l公斤的EM菌种,衢州菌种,最后盖上桶盖,不必完全密封,菌种生产厂家,将桶置于暗室内让其在半密封状态下发酵。
(3)室温在25—35℃,发酵进行到第3天时,水面会出现泡沫,这时需加入发酵促进剂50克,加快发酵速度,促进有益微生物的生成;第8天时,泡沫慢慢消失,水面浮起一片白色的悬浮物;到第l1天时,需加入0.5公斤的蜂蜜:到第l3天左右时,悬浮物沉人桶底,发酵结束。