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细胞培养小妙招

1、离开细胞房的时候要给细胞房照紫外，超净台要用完就开紫外。

2、发现有污染要迅速处理掉，特别是同时养了很多种细胞; 细菌污染、真菌污染很容易发现（这两种污染是环境中带来的，多注意一下卫生条件是可以杜绝的），支原体污染的话，细胞会长的慢，若是珍贵的细胞可以买个支原体清除剂杀一杀，还是可以挽救的。

3、冻存细胞复苏后第二天要更换一次培养基。

    细胞培养的污染源:微生物污染：微生物污染的原因可分为2个阶段：实验准备阶段和实验操作过程。准备阶段的原因包括：实验耗材灭菌不彻底；细胞房清洁度不够，增加微生物污染风险；超净台洁净度不够，三明抗体，消毒不够彻底，紫外线没有预先照射足够时间，表面没有用酒精擦拭；没有带无菌乳胶手套；试剂本身已经污染，没有检测出来。实验操作中的污染，往往是不够严谨，粗心大意造成，如：手从无菌试剂的上方经过；移液器操作不当，抗体价格，液体接触到移液器前端；移液管吸液过猛；枪头没有更换，较差污染等。不同的微生物污染物对细胞的影响也有差别，微生物中支原体和病毒对细胞形态和技能的影响是长期的，缓慢的和潜在的。而霉菌和细菌增殖迅速，能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质杀灭细胞。  

   为何培养基保存于 4°C 冰箱中，颜色会偏暗红色，抗体销售，且 pH 值会越来越偏碱性？

   培养基保存于 4°C 冰箱中，培养基内之 CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而 培养基中之酸碱指示剂(通常为 phenolred)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之 结果，抗体多少钱，将造成细胞生长停滞或si亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之 CO2，以调整 pH 值。

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