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小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用对数生长期的MB49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料，6-12周龄的雌性C57/BL6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个，10^4-10^5个， .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上，建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效，成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下，发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率，研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。该方法成瘤率高，具有很强的实用性，但是膀胱ai模型插管要求高，肿liu细胞容易外渗，并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。

HBV转基因模型的建立方法

（1）方法:主要使用各种转基因技术来创建HBV病毒转基因小鼠模型。转基因小鼠模型可分为HBV部分片段和HBV全长或超长序列模型。

（2）模型特征HBV转基因小鼠不受HBV的影响，不会引起免yi。该模型可用于观察HBV对肝细胞的直接破坏作用。含有外源启动子的HBsAg转基因小鼠（50-4）产生大量HBsAg大包膜蛋白。这会导致很长的，有时是分支的杆状HBsAg积聚在肝细胞的内质网中，动物实验外包服务，并且无法有效分泌。肝细胞显示出毛玻璃变色并损害肝细胞。转基因小鼠中的HBV标记主要在gan脏中表达，也可以在shen脏，yi腺和外周血等qi官中表达，尤其是在1，096 bp 1.3拷贝的HBV转基因小鼠中。xue清HBV DNA的水平相当于3x10000000至9x10000000基因组当量/毫升，相当于慢性HBVgan染者的水平。它可以检测血液中的HBsAg，S1前和HBeAg，是用于yao物筛选的you秀模型。

（3）建立比较yao物HBV转基因小鼠模型在HBV分子生物学和免yi学研究中，特别是在加强肝细胞HBV感ran的分子机制方面，具有重要意义。

实验动物的采集方法

1. 大鼠、小鼠的采集：用颈椎脱臼法处死动物，剥离出胸骨或股骨，用吸取少量的Hank平衡盐溶液，冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查，可将胸骨或股骨剪断，小动物实验外包，将其断面的挤在有稀释液的玻片上，混匀后涂片凉干即可染色检查。

2. 大动物的采集：狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤，然后估计好皮肤到的距离，动物实验外包，把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧，动物实验外包 价格，右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入，穿入固定后，轻轻左右旋转将穿刺针钻入，当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集，一般采用髂骨穿刺。

狗等大动物常用的穿刺点：胸骨：穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各点的中点。胫骨：穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔，防止发生。

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