稳定同位素化学|稳定同位素|青志生物

定量蛋白质组学通过批量观察正常与疾病细胞或组织在蛋白质表达谱上的差异，稳定同位素，从整体水平上规模化筛选和发掘与疾病相关的蛋白，为致病机理研究和临床应用提供重要参考信息。18O同位素标记技术是定量蛋白质组的一种常用技术［1～5］。蛋白质酶切后的肽段，在胰蛋白酶的催化下，C-末端的两个16O原子被替换成18O原子，从而使质谱检测产生4Da的质量差异。通过比较标记肽段和未标记肽段的峰面积强度，得到一对蛋白样本的相对定量关系。尽管该标记反应具有条件温和，标记前后肽段的理化性质不发生改变，能和肽段的其它分离分析方法兼容等优点，但却由于反应条件极难控制，反应后标记产物不稳定而影响其在实验室的广泛应用。有研究基于18O同位素的标记原理，讨论了肽段分散度和胰酶灭活两个重要因素对标记的影响，稳定同位素结果分析，并据此对方法进行了优化。相比文献［6］采用的水浴孵育标记和沸水加热灭活技术，本方法标记时间短，标记效率强，抑制回交反应。实验结果显示，即便对于复杂的多肽混合物体系，采用本方法也能获得gao效的标记结果（18O/16O峰面积比值>99%）。

稳定性同位素示踪技术的特点

(1) 由于稳定性同位素不具备放射性，无论在分离、标记化合物合成及应用过程中均无特殊防护要求，操作简便，使用安全，无du性，稳定同位素，可直接用于动物及人类的营养学、临床医学研究及医疗诊断等。

(2) 随着分离技术的日趋成熟，稳定性同位素的来源非常充沛。例如，13C 、15N 、18O 等稳定性同位素通过低温精馏法、化学交换法生产，全世界达到数百公斤的生产规模。随着产量的提高，稳定性同位素的价格也有了较大幅度的下降。

(3) 稳定性同位素的测定方法有了很大的发展。无论是质谱法，还是he磁共振法，都经过了改良和发展，提高了灵敏度，操作十分简便、jing确，有力de推动了稳定性同位素的应用。

(4) 稳定性同位素示踪技术结合放射性同位素的标记技术特点，两者优势互补，交替运用，在相应的研究领域收效更为显著。