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细胞增殖检测

? ? ?本公司应用MTT比色法, 检测细胞存活和生长。其检测原理为huo细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan,并沉积在细胞中,细胞周期,而死细胞无此功能。二jia基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的Formazan,用酶联mian疫检测仪在一定波长处测定其光吸收值,可间接反映huo细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

? ? ?该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿liu药wu筛选、细胞毒性试验、以及肿liu放she敏感性测定等。服务内容 ? ? ?1. 细胞接种:收到客户细胞后,我们会用细胞计数板计数细胞,细胞,得出细胞悬液浓度。计算出应稀释的倍数,按MTT试剂盒要求在96孔板内接种 相应浓度的细胞悬液;

? ? ?2. 细胞培养:然后在无菌恒温细胞培养箱内培养接种好的96孔细胞培养板,并实时观察细胞状态; ?

? ? ?3. yao物处理并呈色:按不同浓度梯度加入yao物作用细胞;

? ? ?4. 溶解,比色:加入MTT检测试剂,按操作要求孵育相应时间,在mei标仪内检测对照组和实验组的吸光值。并处理数据得出比色结果。






磁性细胞标记方式

应用MACS技术进行磁性细胞分选重要的一点是高质量的标记。要尽可能地增强阳性细胞的标记,并减弱背景染色。有两种基本的磁性标记方式:直接标记和间接标记。

1、直接磁性细胞标记(Direct magnetic cell labeling)

(磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞)直接标记是快速、特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。

2、间接磁性细胞标记(Indirect magnetic cell labeling )

(磁珠结合不需要的细胞,游离于磁场的细胞为所需细胞)间接磁性细胞标记需要联合使用单ke隆或者多ke隆抗ti和MACS间标微珠。未结合抗ti、生物素化抗ti或者荧光素标记抗ti均可作为一抗标记细胞,细胞迁移实验,再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗,均可用于间接标记。间接标记主要在如下情况时选用:当没有直标磁珠时;需要用几种抗ti的混合物同时分选或去除多种类型的细胞;间接标记有放大作用,因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用;使用自备或者配体的磁珠分选中。( -般而言,阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大,阳性分离法用行更多。)






杂交瘤细胞基因测序

杂交瘤细胞有丢失高特异性高活性的风险,或者细胞状态不好乃至。而经过杂交瘤测序,可以获得相应的序列,可以以重组蛋白的方式来稳定获得;从而使得研发或生产者不必以杂交瘤细胞为载体保留该,而可以以碱基序列的形式进行保存和传播交流、鉴定。同时还可以使用获得的测序结果进行等方面的申请审批。有时为了进一步大规模生产或进行人源化等生物工程操作/修饰,有必要了解杂交瘤所表达的对应的基因序列以进一步进行生物工程操作与生产。

相较于直接对进行基于蛋白质分析的测序相比,癌细胞,得益于基因测序技术的发展,杂交瘤测序可以提供的结果,防止蛋白测序中如亮氨酸/异亮氨酸较难区分等潜在风险。






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