黄曲霉毒素B1定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
【概要】
黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是一种剧毒物质,对人和动物具有极强的毒性及致癌性。主要污染花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品。黄曲霉毒素B1在天然食品中最为常见,是大部分食品的必检项目之一。
【实验原理】
检测基于抗原抗体反应。酶标板微孔条上预包被AFB1抗体,加入校准品/样本、AFB1-HRP后,校准品/样本中残留的AFB1同AFB1-HRP竞争微孔条上预包被抗体的抗原结合位点。因此,结合在微孔条上的AFB1-HRP量与校准品/样本中残留AFB1的浓度呈负相关,经TMB底物显色,样本吸光值与其残留AFB1的含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中AFB1的含量。
【检测范围】
定量检测谷物及其制品、配合饲料、DDGS、玉米胚芽粕/饼、喷浆玉米皮、玉米蛋白粉等样本中黄曲霉毒素B1的含量。
关于检测样本的说明:在追求简便高效的同时,试剂盒针对不同种类的饲料样本进行了必要的优化,但一些特殊样本仍可能对试剂盒造成影响。为此,我们开发了针对特殊样本的前处理方法。如有特殊样本需检测,请致电我们,我们会最大程度保证您的检测准确性。
【技术参数】
回收率 | 100±20% |
最低检测限 | 2ppb |
反应温度 | 20~25℃ |
反应时间 | 20min |
【试剂盒组成】
编号 名称 含量 瓶盖颜色 1 10×浓缩洗液 50mL/瓶×1 白色 2 预混板 96孔板×1 3 检测板 96孔板×1 4 校准品(1~6) 1mL/瓶×6 黑色 5 AFB1酶标试剂 14mL/瓶×1 红色 6 底物液A 7mL/瓶×1 白色 7 底物液B 7mL/瓶×1 棕色 8 终止液 7mL/瓶×1 黄色 9 样本稀释液 50mL/瓶×1 白色 其他 盖板膜 2张、质检报告1份、说明书1份
校准品1~6浓度分别为:0ppb、2ppb、5ppb、10ppb、20ppb、50ppb。(1ppb=1ng/mL=1ng/g=
1μg/kg)(注:样本在处理过程中稀释了10倍,校准品实际浓度为设定浓度的1/10,计算原始样本浓度时无需换算。)
【所需材料】(不提供)
设备 | 备注 | 设备 | 备注 |
酶标仪 | 450/630nm | 天平 | 感量0.01g |
振荡器或摇床 |
| 离心机(或whatmanNO.1滤纸) | 4000rpm |
实验用粉碎机 或粮食碾磨机 | 20目以上 | 移液器(及枪头) | 单道10~100mL、100~1000mL 多道30~300mL |
量筒 | 50mL | 离心管 | 1.5mL |
洗板机(或洗瓶) |
| 甲醇 | 分析纯 |
玻璃容器 | 100ml以上,有盖 | 加样槽、吸水纸、计时器、蒸馏水 |
|
【注意事项】
? 每种试剂仅适于龙科方舟AFB1试剂盒,其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂,不同批次产品中试剂不可混用;
? 不可使用过期试剂。
? 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻。用前回温至20~25℃,并避免试剂在室温条件存放过久。
? 浓缩洗液及样本稀释液在4℃保存可能有结晶析出,于60℃水浴中加热溶解即可。
? 校准品、底物液B以及样本提取物对光敏感,避免直接暴露在光线下。
? 校准品、样本提取液易挥发,使用后应立即盖紧瓶盖。
? 终止液为2M 硫酸,避免皮肤及黏膜接触。
? AFB1为剧毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必须在30%次氯酸钠溶液中浸泡至少1h,穿戴手套、防护服,避免与试剂直接接触,一旦接触,必须立即用大量水冲洗。