供应布鲁氏菌核酸检测试剂盒
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产品详情（兰州市布鲁氏菌核酸检测试剂盒厂家）
产品名称： 布鲁氏菌核酸检测试剂盒
产品货号： wi97020
产 地： 国产
详 细 说 明
【产品名称】 通用名称：沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法） 英文名称：Salmonella Nucleic acid Detection Kit(Loop-mediated Isothermal Amplification Method) 汉语拼音：sha men shi jun he suan jian ce shi ji he(huan jie dao heng wen kuo zeng fa) 【包装规格】 包装规格：24 次装 【预期用途】 试剂盒采用环介导恒温扩增法结合荧光染料显色的体外扩增和检测技术，适用于食品或环境中沙门氏菌快速定性检测。 【检测原理】 环介导恒温扩增 (loop-mediated isothermal amplification)是针对靶序列上 6 个区段，采用 4 条特异引物及一种具有链置换 活性的 DNA 聚合酶，在 65℃左右完成恒温扩增。在环介导恒温扩增反应中，产生肉眼可见的副产物——焦磷酸镁乳白色沉 淀，反应产物在荧光染料作用下，阴阳性结果显色差异明显，实现了肉眼判读结果。 【主要组成成分】 组成成分 规 格 DNA提取液 960μL ×2管 HF反应管 ＊Sal 共24管 阳性对照DNA Sal 60μL×1管 阴性对照 60μL×1管 ＊附注：HF 反应管为环介导恒温扩增反应管，内含工作液（包括反应液及 Bst DNA 聚合酶），显色液和稳定液。 【储存条件及有效期】 本试剂盒储存于-20℃下有效期为六个月（请在有效期内使用）。 【适用仪器】 可恒温设备，如恒温金属浴、恒温水浴锅、PCR 仪等。 【样本要求】 1. 适用样本类型：增菌液或可疑菌落样本。 2. 样本处理：样本处理、增菌培养和分离按照 GB/T 4789.4-2010 标准方法进行。 3. 样本存放：待测样本在 0℃-4℃保存不应超过 24h；-20℃长期保存，应避免反复冻融。 【检测方法】 1. 样本处理 AA 增菌液模板 DNA 的制备： a) 取标准方法培养的增菌液 1mL 加到 1.5mL 无菌离心管中，10000r/min 离心 2min，尽量吸弃上清； b) 加入 80μL DNA 提取液，混匀后沸水浴 10min，置冰上 10min； c) 10000 r/min 离心 2min，上清即为核酸模板；取上清置-20℃可长期保存备用。 BB 可疑菌落模板 DNA 的制备： 对于标准方法分离到的可疑菌落，可直接挑取可疑菌落，加入 80μL DNA 提取液，混匀后沸水浴 10min，置冰上 10min 再按照上述步骤 C)制备模板 DNA 以待检测。 2. 核酸扩增 a) 取出 n 管 HF 反应管(n=阳性对照+阴性对照+样本数)于室温解冻； b) 向上述 n 管 HF 反应管内按顺序分别加入阴性对照、待检模板和阳性对照各 2.5μL，注意加样时枪头要穿透稳定 图 1：HF 反应管内的各成分及其含量 沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法） 广州华峰生物科技有限公司 2010 年 6 月第一版，第 2页 液层加至 HF 反应管大腔内（见图 1，工作液腔），盖紧管盖并做好标记，移至反应区； c) 置 65℃恒温反应 60min。 3. 结果检测 反应结束，将 HF 反应管倒置甩动 2 次，再正置甩动 2 次，使工作液与显色液充分混合，冷却至室温后，建议在 黑色背景下观察结果。 【结果判断】 在阴性对照反应管液体颜色呈橙色，阳性对照反应管液体颜色呈绿色的条件下： a) 若待检样本反应管中液体颜色呈绿色，则可报告该样本检测结果为沙门氏菌阳性； b) 若待检样本反应管中液体颜色呈橙色，则可报告该样本检测结果为沙门氏菌阴性； 若阴阳性对照反应管结果与上述情况不符，则本次检测结果无效，应重新检测。 【产品性能指标】 1. 本试剂盒能够检测出沙门氏菌，对于非沙门氏菌显示阴性结果。 2. 沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法）和传统培养方法（GB/T 4789.4-2010）对比，敏感度和特异性分别 为 100%和 95.2%。 【注意事项】 1. 本试剂盒仅用于体外检测，使用前请仔细阅读试剂盒说明书全文。 2. 实验室应严格分区操作，各区物品应专用，不得交叉使用，避免污染： 第一区： 试剂准备区 —— 准备所需试剂 第二区： 样本制备区 —— 待测样本及对照样本处理 第三区： 反应和观察区 —— 扩增及结果观察 3. 本试剂盒使用需特别注意避免剧烈震荡和颠倒放置，HF 反应管内含显色液，反应前需确保显色液与工作液完全分 隔。 4. 试剂盒内阳性对照应视为具有污染性物质，应注意避免污染其他样本和反应试剂，导致错误检测结果。 5. 试剂盒内各试剂使用前，充分解冻，并避免反复冻融。 6. 加样时应尽量避免产生气泡，反应前注意检查各反应管是否盖紧，以免泄漏，造成污染。 7. 在-20℃保存的样本 DNA 提取物，应在加样前置室温解冻，作短暂离心后使用。 8. 反应温度应在 65℃±1℃范围内，请确保仪器的真实温度，建议使用经校正的仪器。 9. 结果观察时工作液和显色液混合不均匀，会影响显色干扰判断，应使工作液和显色液充分混匀。但应避免振荡过于 剧烈，反应产物外逸，建议在通风橱中操作。 10. 观察完毕后反应管对环境无害，应密封在专用的容器内，丢弃于指定地点，实验过程中的其它废弃物和一次性耗材 需经过灭菌后丢弃。 11. 实验过程中建议穿工作服，为免造成后续污染，应密封丢弃。 12. 工作台及各物品定期用 1%次氯酸钠、75%酒精或紫外灯处理。 注：图片仅供参考 ，具体以实物为准
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产品货号： wi97020
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【产品名称】 通用名称：沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法） 英文名称：Salmonella Nucleic acid Detection Kit(Loop-mediated Isothermal Amplification Method) 汉语拼音：sha men shi jun he suan jian ce shi ji he(huan jie dao heng wen kuo zeng fa) 【包装规格】 包装规格：24 次装 【预期用途】 试剂盒采用环介导恒温扩增法结合荧光染料显色的体外扩增和检测技术，适用于食品或环境中沙门氏菌快速定性检测。 【检测原理】 环介导恒温扩增 (loop-mediated isothermal amplification)是针对靶序列上 6 个区段，采用 4 条特异引物及一种具有链置换 活性的 DNA 聚合酶，在 65℃左右完成恒温扩增。在环介导恒温扩增反应中，产生肉眼可见的副产物——焦磷酸镁乳白色沉 淀，反应产物在荧光染料作用下，阴阳性结果显色差异明显，实现了肉眼判读结果。 【主要组成成分】 组成成分 规 格 DNA提取液 960μL ×2管 HF反应管 ＊Sal 共24管 阳性对照DNA Sal 60μL×1管 阴性对照 60μL×1管 ＊附注：HF 反应管为环介导恒温扩增反应管，内含工作液（包括反应液及 Bst DNA 聚合酶），显色液和稳定液。 【储存条件及有效期】 本试剂盒储存于-20℃下有效期为六个月（请在有效期内使用）。 【适用仪器】 可恒温设备，如恒温金属浴、恒温水浴锅、PCR 仪等。 【样本要求】 1. 适用样本类型：增菌液或可疑菌落样本。 2. 样本处理：样本处理、增菌培养和分离按照 GB/T 4789.4-2010 标准方法进行。 3. 样本存放：待测样本在 0℃-4℃保存不应超过 24h；-20℃长期保存，应避免反复冻融。 【检测方法】 1. 样本处理 AA 增菌液模板 DNA 的制备： a) 取标准方法培养的增菌液 1mL 加到 1.5mL 无菌离心管中，10000r/min 离心 2min，尽量吸弃上清； b) 加入 80μL DNA 提取液，混匀后沸水浴 10min，置冰上 10min； c) 10000 r/min 离心 2min，上清即为核酸模板；取上清置-20℃可长期保存备用。 BB 可疑菌落模板 DNA 的制备： 对于标准方法分离到的可疑菌落，可直接挑取可疑菌落，加入 80μL DNA 提取液，混匀后沸水浴 10min，置冰上 10min 再按照上述步骤 C)制备模板 DNA 以待检测。 2. 核酸扩增 a) 取出 n 管 HF 反应管(n=阳性对照+阴性对照+样本数)于室温解冻； b) 向上述 n 管 HF 反应管内按顺序分别加入阴性对照、待检模板和阳性对照各 2.5μL，注意加样时枪头要穿透稳定 图 1：HF 反应管内的各成分及其含量 沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法） 广州华峰生物科技有限公司 2010 年 6 月第一版，第 2页 液层加至 HF 反应管大腔内（见图 1，工作液腔），盖紧管盖并做好标记，移至反应区； c) 置 65℃恒温反应 60min。 3. 结果检测 反应结束，将 HF 反应管倒置甩动 2 次，再正置甩动 2 次，使工作液与显色液充分混合，冷却至室温后，建议在 黑色背景下观察结果。 【结果判断】 在阴性对照反应管液体颜色呈橙色，阳性对照反应管液体颜色呈绿色的条件下： a) 若待检样本反应管中液体颜色呈绿色，则可报告该样本检测结果为沙门氏菌阳性； b) 若待检样本反应管中液体颜色呈橙色，则可报告该样本检测结果为沙门氏菌阴性； 若阴阳性对照反应管结果与上述情况不符，则本次检测结果无效，应重新检测。 【产品性能指标】 1. 本试剂盒能够检测出沙门氏菌，对于非沙门氏菌显示阴性结果。 2. 沙门氏菌核酸检测试剂盒（环介导恒温扩增法）和传统培养方法（GB/T 4789.4-2010）对比，敏感度和特异性分别 为 100%和 95.2%。 【注意事项】 1. 本试剂盒仅用于体外检测，使用前请仔细阅读试剂盒说明书全文。 2. 实验室应严格分区操作，各区物品应专用，不得交叉使用，避免污染： 第一区： 试剂准备区 —— 准备所需试剂 第二区： 样本制备区 —— 待测样本及对照样本处理 第三区： 反应和观察区 —— 扩增及结果观察 3. 本试剂盒使用需特别注意避免剧烈震荡和颠倒放置，HF 反应管内含显色液，反应前需确保显色液与工作液完全分 隔。 4. 试剂盒内阳性对照应视为具有污染性物质，应注意避免污染其他样本和反应试剂，导致错误检测结果。 5. 试剂盒内各试剂使用前，充分解冻，并避免反复冻融。 6. 加样时应尽量避免产生气泡，反应前注意检查各反应管是否盖紧，以免泄漏，造成污染。 7. 在-20℃保存的样本 DNA 提取物，应在加样前置室温解冻，作短暂离心后使用。 8. 反应温度应在 65℃±1℃范围内，请确保仪器的真实温度，建议使用经校正的仪器。 9. 结果观察时工作液和显色液混合不均匀，会影响显色干扰判断，应使工作液和显色液充分混匀。但应避免振荡过于 剧烈，反应产物外逸，建议在通风橱中操作。 10. 观察完毕后反应管对环境无害，应密封在专用的容器内，丢弃于指定地点，实验过程中的其它废弃物和一次性耗材 需经过灭菌后丢弃。 11. 实验过程中建议穿工作服，为免造成后续污染，应密封丢弃。 12. 工作台及各物品定期用 1%次氯酸钠、75%酒精或紫外灯处理。 注：图片仅供参考 ，具体以实物为准
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